一、抑菌圈法又叫擴散法，是利用待測藥物在瓊脂平板中擴散使其周圍的細菌生長受到抑製而形成透明圈，即抑菌圈，根據抑菌圈大小判定待測藥物抑菌效價的一種方法。抑菌圈法操作便捷、簡單易行、成本低廉、結果準確可靠，是抑菌試驗的經典方法，被廣泛使用。常用於抗生素產生菌的分離篩選。工具菌采用抗生素的敏感菌。若被檢菌能分泌某些抑製工具菌生長的物質，如抗生素等，便會在該菌落周圍形成工具菌不能生長的抑菌圈，很容易被鑒別出來。
二、主要有K-B法(Kirby-Bauertest)、牛津杯法和打孔法三種。K-B法即濾紙片法，選用質地均勻的濾紙，用打孔機打成直徑相同的圓片，滅菌後烘幹，浸泡於待測樣品中，然後置於試驗平板中培養一段時間後測定抑菌圈大小的一種方法。牛津杯法又稱杯碟法，將已滅菌的牛津杯置於試驗平板中，往杯中注入一定量的待測樣品，培養一段時間後測定抑菌圈大小的一種方法。打孔法，是指用已滅菌的打孔器或鋼管在試驗平板上打孔，往孔中注入一定量的待測樣品，培養一段時間後測定抑菌圈大小的一種方法。
三、菌種的活化及菌液的製備：將冷凍保存的菌種劃線接種至平板培養基，37℃培養24h；挑單菌落接種至100mL液體培養基，37℃、200r/min搖床培養過夜，菌液備用。傾注平板法：先往已滅菌的平板中接種1mL菌液，然後傾注約20mL已冷卻至50℃左右的平板培養基，混合均勻，水平靜置凝固後備用。預加菌液傾注平板法：往已冷卻至50℃左右的平板培養基中注入一定量的菌液，混合均勻，傾注平板(約20mL/平板)，水平靜置凝固後備用。
四、結果表明：打孔法操作簡單、方便快捷，獲得的抑菌圈質量高、重複性好，是優先選用的方法。
